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產(chǎn)品展示
  • 產(chǎn)品名稱：牛白細胞介素1β（IL-1β）ELISA試劑盒
  • 產(chǎn)品型號：H-78807
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地：上海
  • 訪問次數(shù)：1433
  • 產(chǎn)品價格：3800
  • 簡介內(nèi)容：中文名稱：牛白細胞介素1β（IL-1β）ELISA試劑盒實驗方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA原理操作步驟：具體請參照說明書技術服務：從標本收集、保存、預試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術指導科研用途: 科研ELISA檢測試劑盒
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詳細內(nèi)容

牛白細胞介素1β（IL-1β）ELISA試劑盒

牛白細胞介素1β（IL-1β）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍：2ng/L -50 ng/L                                                          
規(guī)格：96T
使用目的：
本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關液體樣本中白細胞介素1β（IL-1β）含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛白細胞介素1β（IL-1β）水平。用純化的牛白細胞介素1β（IL-1β）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素1β（IL-1β），再與HRP標記的白細胞介素1β（IL-1β）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素1β（IL-1β）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中牛白細胞介素1β（IL-1β）濃度。
試劑盒組成
1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
7
終止液
6ml×1瓶
2
酶標試劑
6ml×1瓶
8
標準品（96 ng/L）
0.5ml×1瓶
3
酶標包被板
12孔×8條
9
標準品稀釋液
1.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1瓶
10
說明書
1份
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2張  
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1個
標本要求 
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
48 ng/L
5號標準品
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
24 ng/L
4號標準品
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
12 ng/L
3號標準品
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
6 ng/L
2號標準品
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
3 ng/L
1號標準品
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
 
 
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
操作程序總結(jié)：
 
 
計算
  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月
 

原創(chuàng)作者：上海恒遠生物科技有限公司

標簽：ELISA試劑盒 牛ELISA試劑盒 IL-1β ELISA試劑盒 

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