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格藍(lán)氏陰性桿菌增菌液基本概述
英文名稱(chēng)：Gram Negative Enrichment Broth
其他名稱(chēng)：格藍(lán)氏陰性桿菌增菌液
級(jí)別：BR
成分(g/L)
胰蛋白胨：20.0
甘露醇：2.0
葡萄糖：1.0
檸檬酸鈉：5.0
磷酸氫二鉀：4.0
氯化鈉：5.0
去氧膽酸鈉：0.5
磷酸二氫鉀：1.5
PH：6.8-7.2
用法：稱(chēng)取本品39克,加1000ml蒸餾水，加熱煮沸直至完全溶解，分裝，經(jīng)115℃滅菌15分鐘后備用
標(biāo)準(zhǔn)：GB/T4789.30-2003
性狀：干燥粉末。易吸濕。
用途：生化研究。用于沙門(mén)氏菌和志賀菌的增菌培養(yǎng)
保存：RT
細(xì)菌總數(shù)菌顯色培養(yǎng)基用途：
細(xì)菌總數(shù)菌顯色培養(yǎng)基主要是用于快速檢測(cè)食品、水質(zhì)和環(huán)境中的細(xì)菌總數(shù)，細(xì)菌顯紅
色。
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基主要是用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測(cè)。大腸桿菌顯藍(lán)綠色，大腸菌群顯無(wú)色，其它菌顯黃色或無(wú)色，革蘭氏陽(yáng)性菌被抑制。
培養(yǎng)基和試劑消毒處理方法
培養(yǎng)基通常采用高壓濕熱滅菌法121 ℃滅菌15分鐘，特殊培養(yǎng)基按使用者的特殊要
求進(jìn)行滅菌（如含糖培養(yǎng)基115 ℃滅菌20分鐘）。
部分培養(yǎng)基（如嗜鹽瓊脂培養(yǎng)基、膽硫乳培養(yǎng)基），只能煮沸滅菌。
對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基或添加物質(zhì)，應(yīng)采用膜過(guò)濾方法進(jìn)行過(guò)濾除菌。
即用型試劑不需滅菌，應(yīng)參見(jiàn)相關(guān)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)或供應(yīng)商使用說(shuō)明，直接使用。
器具和設(shè)備消毒處理方法
濕熱滅菌：采用高壓滅菌器， 121 ℃滅菌20分鐘，適用于玻璃器皿、移液器吸頭
、塑料瓶等。按照GB 15981 的規(guī)定，評(píng)價(jià)高壓滅菌器的殺菌效果。
干熱滅菌：采用干燥箱滅菌，160 ℃滅菌2h，180 ℃滅菌2h，適用于玻璃器皿，不
銹鋼器具等。
格藍(lán)氏陰性桿菌增菌液操作方法和注意事項(xiàng)如下
加水
打開(kāi)滅菌鍋蓋，向鍋內(nèi)加水到水位線(xiàn)。立式消毒鍋?zhàn)詈糜靡阎箝_(kāi)過(guò)的水，以便減少水垢在鍋內(nèi)的積存。注意水要加夠，防止滅菌過(guò)程中干鍋。裝料、加蓋滅菌材料放好后，關(guān)閉滅菌器蓋，采用對(duì)角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋，使蒸汽鍋密閉，勿使漏氣。
排氣
打開(kāi)排氣口(也叫放氣閥)。用電爐加熱，待水煮沸后，水蒸氣和空氣一起從排氣孔排出，當(dāng)有大量蒸汽排出時(shí)，維持5min，使鍋內(nèi)冷空氣完全排凈。
升壓、保壓和降壓
當(dāng)鍋內(nèi)冷空氣排凈時(shí)，即可關(guān)閉排氣閥，壓力開(kāi)始上升。當(dāng)壓力上升至所需壓力時(shí)，控制電壓以維持恒溫，并開(kāi)始計(jì)算滅菌時(shí)間，待時(shí)間達(dá)到要求（一般培養(yǎng)基和器皿滅菌控制在121℃，20min）后，停止加熱，待壓力降至接近“0”時(shí)，打開(kāi)放氣閥。注意不能過(guò)早過(guò)急地排氣，否則會(huì)由于瓶?jī)?nèi)壓力下降的速度比鍋內(nèi)慢而造成瓶?jī)?nèi)液體沖出容器之外。
滅菌后的培養(yǎng)基空白培養(yǎng)
滅菌后的培養(yǎng)基放于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，經(jīng)24h培養(yǎng)無(wú)菌生長(zhǎng)，可保存?zhèn)溆�；斜面培養(yǎng)基取出后，立即擺成斜面后空白培養(yǎng)；半固體的培養(yǎng)基垂直放置凝成半固體深層瓊脂后，空白培養(yǎng)。
干熱滅菌法
通過(guò)使用干熱空氣殺滅微生物的方法叫干熱滅菌。一般是把待滅菌的物品包裝就緒后，放入電烘箱中烘烤，即加熱至160～170℃維持1～2h。
干熱滅菌法常用于空玻璃器皿、金屬器具的滅菌。凡帶有膠皮的物品，液體及固體培養(yǎng)基等都不能用此法滅菌。
滅菌前的準(zhǔn)備
玻璃器皿等在滅菌前必須經(jīng)正確包裹和加塞，以保證玻璃器皿于滅菌后不被外界雜菌所污染。常用玻璃器皿的包扎和加塞方法如下：平皿用紙包扎或裝在金屬平皿筒內(nèi)；三角瓶在棉塞與瓶口外再包以厚紙，用棉繩以活結(jié)扎緊，以防滅菌后瓶口被外部雜菌所污染；吸管以拉直的曲別針一端放在棉花的中心，輕輕捅入管口，松緊必須適中，管口外露的棉花纖維統(tǒng)一通過(guò)火焰燒去，滅菌時(shí)將吸管裝入金屬管筒內(nèi)進(jìn)行滅菌，也可用紙條斜著從吸管尖端包起，逐步向上卷，頭端的紙卷捏扁并擰幾下，再將包好的吸管集中滅菌。
干燥箱滅菌
將包扎好的物品放入干燥烘箱內(nèi)，注意不要擺放太密，以免妨礙空氣流通；不得使器皿與烘箱的內(nèi)層底板直接接觸。將烘箱的溫度升至160～170℃并恒溫1～2h，注意勿使溫度過(guò)高，超過(guò)170℃，器皿外包裹的紙張、棉花會(huì)被烤焦燃燒。如果是為了烤干玻璃器皿，溫度為120℃持續(xù)30分鐘即可。溫度降至60～70℃時(shí)方可打開(kāi)箱門(mén)，取出物品，否則玻璃器皿會(huì)因驟冷而爆裂。
用此法滅菌時(shí)，絕不能用油、蠟紙包扎物品。
火焰滅菌
直接用火焰灼燒滅菌，迅速?gòu)氐�。�?duì)于接種環(huán)，接種針或其它金屬用具，可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進(jìn)行滅菌。此外，在接種過(guò)程中，試管或三角瓶口，也采用通過(guò)火焰而達(dá)到滅菌的目的。
結(jié)果
記錄各種不同物品所用的滅菌方法及滅菌條件（溫度、壓力等）。
試述高壓蒸汽滅菌的過(guò)程及注意事項(xiàng)。
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