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“T4 DNA連接酶”參數(shù):
英文名稱:T4 DNA Ligase
CAS號:9015-85-4
分子量:55.3kDa,單體級別: BR
來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度:30Weiss u/ul(6000CEU/ul)
活性定義:是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個weiss單位相當于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位:20ul反應(yīng)體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量)
酶活性分析混合物:66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液(#B69):400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
抑制劑:當反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時,可強烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標準。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉(zhuǎn)化時,連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細胞體積中的10%;電轉(zhuǎn)化之前,先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物質(zhì)量控制:測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測:粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀:液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù);連接酶介導(dǎo)的RNA檢測;位點特異性突變;擴增片段長度多態(tài)性
保存: -20°C
生化試劑:
生化試劑是指有關(guān)生命科學(xué)研究的生物材料或有機化合物,以及臨床診斷、醫(yī)學(xué)研究用的試劑。由于生命科學(xué)面廣、發(fā)展快,因此該類試劑品種繁多、性質(zhì)復(fù)雜。
分光純:
分光純試劑是指使用分光光度分析法時所用的溶液,有一定的波長透過率,用于定性分析和定量分析。
光譜純:
光譜純試劑通常是指經(jīng)發(fā)射光譜法分析過的、純度較高的試劑。
產(chǎn)品結(jié)算方式:款到發(fā)貨;(長期合作老客戶可享受優(yōu)先發(fā)貨權(quán))
產(chǎn)品到貨方式:物流、汽運、 EMS 、韻達、四通一達運輸均可,款到當天發(fā)貨,國內(nèi) 2~4 天到貨。
“T4 DNA連接酶”訂購流程:
1、產(chǎn)品詢價:您可以通過電話、郵件、傳真或在線客戶方式詢價,請報您所需的產(chǎn)品名稱或CAS號進行查詢。同時,請?zhí)峁┠馁Y料(含單位名稱、聯(lián)系地址、聯(lián)系人、電話、及收貨地址和傳真)以便第一時間為您建立客戶信息,以便后期直接下單。
2、產(chǎn)品報價:銷售代表會據(jù)您的需求,與內(nèi)部相關(guān)部門核實庫存并進行報價。期貨產(chǎn)品會給出定制時間。
3、確認需求:請您確認實際需求的產(chǎn)品名稱、規(guī)格包裝、含量、數(shù)量、開票需求、付款方式和發(fā)貨方式、運費。在線注冊好的會員提交訂單后需要及時與在線客服聯(lián)系,確認現(xiàn)貨和運費,銷售代表會將最終訂貨合同發(fā)給您。
4、簽定合同: 擬定合同,雙方簽字蓋章確認,請注意產(chǎn)品的報價有效期,務(wù)必在有效期內(nèi)處理。
5 費用支付:在雙方確認了訂單內(nèi)容和產(chǎn)品籌備周期之后,請您按照下面的帳號支付服務(wù)費用/貨款。
6 確認付款:公司用戶底單確認:請您在匯款后,將匯出銀行提供的匯款底單傳真至酶聯(lián)免疫學(xué)第三方檢測中心財務(wù)部,以便我們及時確認。
“T4 DNA連接酶”是我公司重點推廣產(chǎn)品,我公司有專業(yè)的技術(shù)人員全程指導(dǎo),請放心購買。發(fā)貨時均會附上質(zhì)檢報告單、使用說明書和推薦用法用量,提供正規(guī)發(fā)票。
原創(chuàng)作者:上海恒遠生物科技有限公司
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