大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒
一、“大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒”詳細(xì)參數(shù)
【檢測(cè)方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產(chǎn)品性狀】:96T/48T,盒裝液體(兩種統(tǒng)一規(guī)格)
【貯藏條件】:2-8°C
【產(chǎn)品有效期】:二年,我公司Elisa試劑盒均為最新批次,可放心購(gòu)買。
【產(chǎn)品主要成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
【種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
【產(chǎn)品單價(jià)】(具體折扣來(lái)電咨詢),可免費(fèi)代測(cè),含稅含運(yùn)費(fèi)。
【標(biāo)本】血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
注:標(biāo)本必須為液體,不含沉淀。
二、“大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒”樣品收集、處理
1、 血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
三、“大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒”具體操作方法
以雙抗體夾心法為例展示:
1、雙抗體夾心法檢測(cè)抗原
操作步驟如下:
1)將特異性抗體與固相載體結(jié)合,形成固相抗體。洗滌除去尚未結(jié)
合的抗體及一些雜質(zhì)。
2)加入待測(cè)標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3)加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4)加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過(guò)比色,測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。在臨床檢驗(yàn)中,此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如 HBeAg、HBsAg、hCG 、AFP等。只要獲得針對(duì)受檢抗原的特異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來(lái)源為抗血清,包被和酶標(biāo)所使用的抗體最好分別取自不同種屬的動(dòng)物。如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測(cè)。
在一步法測(cè)定中,當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時(shí),過(guò)量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過(guò)剩的后帶現(xiàn)象,此時(shí)反應(yīng)后顯色的吸光值(位于抗原過(guò)剩帶上)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(位于抗體過(guò)剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同,如按常法測(cè)讀,所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量,這種現(xiàn)象被為鉤狀效應(yīng)(hook effect),因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí),反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測(cè)定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中 HBsAg、AFP 和尿液 hCG 等)時(shí),應(yīng)注意可測(cè)范圍的最高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。
四、客戶收集樣品要求
·客戶需提供待檢測(cè)抗體和包被用抗原。
·檢測(cè)的樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清、人和動(dòng)物的血清、血漿。
·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存,若長(zhǎng)期保存應(yīng)-70℃。
·樣本量的要求:若一個(gè)指標(biāo)做復(fù)孔檢測(cè)應(yīng)不少于250ul,做單孔檢測(cè)應(yīng)不少于120ul。建議若客戶樣本量充足最好提供500ul以上。
·客戶的樣本收集后,立即按要求保存,切忌反復(fù)凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運(yùn)輸。郵寄前請(qǐng)與技術(shù)支持溝通確認(rèn)。
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原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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