[導(dǎo)讀] 一般來說，ELISA操作技術(shù)員會在一切準(zhǔn)備就緒后開始實驗，而在實驗過程當(dāng)時卻常會出現(xiàn)一些問題。由于ELISA實驗操作步驟復(fù)雜，可能一個小小的誤差就會出現(xiàn)大問題，那么我們要如何解決并完善實驗步驟的誤差問題呢？今天酶聯(lián)免疫學(xué)第三方檢測中心帶給您的資訊主題是：小技巧改變ELISA試劑盒實驗誤差大問題。
①：由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器，不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產(chǎn)生氣泡、速度是否均勻，是否顫動等影響液量的因素均可導(dǎo)致以上情況。高標(biāo)準(zhǔn)要求時應(yīng)使用加樣器。
②：閾值附近實際上是個灰區(qū)，不能截然分為陰性、陽性，國外廠家均要求對這部分可疑標(biāo)本進行奇數(shù)次復(fù)檢，以次數(shù)多者為準(zhǔn)，如一次陽兩次陰最后判為陰，但實際上是否為陰不好說，只有判為可疑，臨床上可以讓患者過一段時間后再測。
③：肉眼觀察稍顯色，酶標(biāo)儀打印為陰性的標(biāo)本在實際工作中是難以避免的，肉眼目測結(jié)果不可靠，應(yīng)以酶標(biāo)儀判讀為準(zhǔn)。
④：不同的ELISA試劑盒廠家產(chǎn)品其生產(chǎn)工藝和操作方法會略有不同，務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作，否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
⑤：加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大，但對閾值附近的標(biāo)本影響極大，建議校對加樣器。
⑥：反應(yīng)時間的誤差，做大量標(biāo)本時，第一孔和最后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
⑦：由陰性變?yōu)閺婈栃栽蚨酁椴僮鬟^程中漏加試劑等有關(guān)。
⑧：臨界值附近標(biāo)本波動為正�，F(xiàn)象，任何ELISA試劑盒均不可避免�？梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
⑨：若不同批號試劑的不同組分(A液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進行交叉使用，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形。
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[ELISA原理圖]
ELISA可以簡單、高效地從瓊脂糖凝膠上純化回收DNA段，同時除去蛋白質(zhì)、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)�？苫厥�100bp–40 kb DNA段，可純化高達10μg的DNA段，回收率可達80%以上(<100bp或>10kb的DNA段回收率為30–50%)。使用ELISA試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等各種分子生物學(xué)實驗。
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