閱讀次數(shù)：2183 發(fā)布時(shí)間：2014/12/3 11:49:01
資深技術(shù)教您怎樣才能更好的使用胎牛血清！
1，血清中包含絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理?
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清(400g，1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以，使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃，沉淀會(huì)自然消失。
2，培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長(zhǎng)期保存嗎?
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。
3，實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的血清?
國(guó)內(nèi)一致認(rèn)為HYCLONE的血清是最好的，但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷，國(guó)外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好，所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量，但是總的來說這兩種價(jià)格普遍偏貴，一般不是太嬌氣的細(xì)胞，國(guó)產(chǎn)的就夠用了。此外，由于國(guó)內(nèi)HYCLONE，GIBCO并沒有生產(chǎn)線，我們只能從代理商那里買，而代理商又魚龍混雜，所以買到假貨的可能性也很大。所以，我一般會(huì)從直銷員那里買血清，有的國(guó)外生物公司由于剛剛進(jìn)入中國(guó)，知名度不高，但是其實(shí)在國(guó)外已經(jīng)做得很不錯(cuò)了，如Wisent等，他們?cè)趪?guó)內(nèi)有辦事處，我會(huì)從那里拿，血清的品質(zhì)和HYCLONE不相上下，但價(jià)格相對(duì)優(yōu)惠很多。
4，如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：
(1)解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。
(2) 血清分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4) 勿將血清置于37℃太久，否則血清會(huì)變得渾濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。
(6) 若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。
5，細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?
一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：
(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過老，破碎的細(xì)胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果;
(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長(zhǎng);
(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格�？蓱�(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。
6，細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?
(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴。
(3) 培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。
(5) 掌握細(xì)胞傳代的最佳時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過老。
7，小牛血清和胎牛血清有何注意事項(xiàng)?
血清保存和使用須注意：血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超過一個(gè)月。解凍血清時(shí) ，應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱，并經(jīng)常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，絕對(duì)不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中，如放在37℃解凍，顏色加深，粘稠度也會(huì)增加，血清在解凍和熱滅活后，應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
如果您對(duì)胎牛血清還有什么疑問的話歡迎致電我司，您可通過QQ在線咨詢、郵箱咨詢、網(wǎng)站留言、電話撥打的方式與我們?nèi)〉寐?lián)系，我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)，祝您工作愉快！
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