閱讀次數(shù)：754 發(fā)布時(shí)間：2017/11/27 9:27:08
研究背景：
非酒精性脂肪性肝炎（NASH）是非酒精性脂肪性肝�。∟AFLD）的最極端形式，其特征為脂肪肝、小葉炎癥和進(jìn)行性細(xì)胞周期性纖維化。肝星狀細(xì)胞（HSC）是響應(yīng)非酒精性纖維化脂肪性肝炎發(fā)展進(jìn)程中的主要細(xì)胞類型。非酒精性纖維化脂肪性肝炎的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，有效的治療方法很少，目前對肝纖維化的機(jī)制了解甚少。然而，越來越多的研究表明microRNAs（miRNAs）參與肝纖維化進(jìn)程的不同階段，包括HSC的激活、增殖和細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的產(chǎn)生和沉積。最近的研究表明，miRNAs可以調(diào)控HSC的活化、增殖和凋亡，從而對肝纖維化進(jìn)程產(chǎn)生影響。
材料與方法：
本研究利用miRNA芯片技術(shù)對營養(yǎng)性纖維化脂肪性肝炎小鼠的miRNA譜進(jìn)行了研究，對可能參與肝纖維化的發(fā)病機(jī)制相關(guān)的miRNAs進(jìn)行了研究，以期為治療NAFLD提供新的藥物靶點(diǎn)。
取材：以甲硫氨酸膽堿缺乏（MCD）飲食喂養(yǎng)至八周齡的雄性C57BL/6J小鼠。馴化1周后，將小鼠分成兩組（每組n=6）。對照組小鼠飼喂添加重酒石酸膽堿-DL甲硫氨酸的飲食，非酒精性脂肪性肝炎組小鼠飼喂MCD飲食。8周后，小鼠在禁食12小時(shí)后死亡。取部分肝臟固定在10％福爾馬林中用于組織學(xué)分析，另取部分肝臟組織于液氮中快速冷凍，-80℃冰箱中儲存?zhèn)溆谩?br />
研究發(fā)現(xiàn)：
本研究在甲硫氨酸膽堿缺乏飲食誘導(dǎo)纖維化的NAFLD小鼠模型的肝臟中觀察到miR-130A-3p的表達(dá)顯著減少，并且發(fā)現(xiàn)在激活的肝星狀細(xì)胞（HSC）中miR-130A-3p的表達(dá)也顯著減少。雙熒光素酶活性測定證實(shí)轉(zhuǎn)化生長因子β受體（TGFBR）1和2都是miR-130a-3p的靶基因，并且TGFBR1和TGFBR2在肝臟中表達(dá)量顯著增加。
在HSCs中過表達(dá)miR-130A-3p抑制了HSC的活化和增殖，并伴隨TGFBR1、TGFBR2、Smad2、Smad3、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9、I型膠原蛋白（Col-1）和Col-4的表達(dá)減少。
miR-130a-3p的過表達(dá)通過誘導(dǎo)caspase依賴性凋亡基因的表達(dá)來促進(jìn)HSC凋亡。si-TGFBR1和si-TGFBR2轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示其對HSC功能的影響與miR-130a-3p一致。TGFBR1和TGFBR2減緩了由miR-130a-3p介導(dǎo)的Smad2、Smad3、Col-1和Col-4的mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平的降低。
本研究結(jié)果表明miR-130a-3p在非酒精性纖維化脂肪性肝炎進(jìn)程中可能通過TGF-β/SMAD信號通路直接靶向TGFBR1和TGFBR2起到負(fù)調(diào)節(jié)HSC活化和增殖的關(guān)鍵作用。
圖miR-130a-3p抑制細(xì)胞增殖和生長并誘導(dǎo)活化的HSC凋亡
品質(zhì)保證
防偽易碎商標(biāo)貼，四招助您分辨真假。
送貨保障
產(chǎn)品均有現(xiàn)貨，多家快遞公司合作準(zhǔn)時(shí)到達(dá)。
售后服務(wù)
產(chǎn)品及實(shí)驗(yàn)問題，提供技術(shù)支持保障。
上海恒遠(yuǎn)免疫學(xué)第三方檢測中心
微信掃描二維碼，參與上海恒遠(yuǎn)活動，
勁爆優(yōu)惠觸手可得！
酶聯(lián)免疫試劑盒,酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)代測,elisa試劑盒,原裝elisa試劑盒,elisa檢測試劑盒,進(jìn)口血清
