有很多客戶向我們咨詢ELISA實驗后如何進行曲線制作？對于那么多的曲線計算公式，我們該如何選擇最佳的擬合方程呢？恒遠生物小編給大家總結：ELISA曲線擬合的那些事。
我們一般可以用軟件繪制也可以通過excel進行制作。按照科學分析方法，如果存在奇異點或者污點，直接采用線性分析不是很好，要對擬合曲線的幾個點進行取舍，同時也可以改用雙對數(shù)直線擬合或者四參數(shù)曲線擬合。
那么常用的曲線擬合回歸方程主要為以下幾種：
第一種是直線回歸：直線回歸是最簡單的回歸模型,也是最基本的曲線擬合回歸分析方法，將所有的測試點擬合為一條直線，其擬合函數(shù)方程式為：y=a+bx。但是因為實際實驗中線性極好的情況下可能直線回歸可以獲得較為理想的R2值。那么如果直線線性不理想的情況下如何擬合？作為擁有十多年ELISA產(chǎn)品生產(chǎn)經(jīng)驗的企業(yè)，我們會推薦用戶進行多項式擬合來改善直線回歸線性不理想的問題。
第二種二次多項式擬合回歸方程：二次多項式成拋物線狀，開口向下或者向上，在很多ELISA實驗中，擬合近似于二次多項式的升段或者降段，所以使用二次多項式擬合時，最好保證取值的范圍都落在曲線的升段或者降段。其擬合函數(shù)方程式為：y=ax2+bx+c
第三種對數(shù)擬合回歸方程：我們將標準品的O.D測值設為x軸，標準品濃度的對數(shù)作為y軸，濃度是自變量，O.D.值是因變量進行曲線擬合。
最后一種是四參數(shù)擬合回歸方程：競爭法和夾心法都可以用到。它的形狀,根據(jù)情況,可能是一個單調上升的類似指數(shù),對數(shù),或雙曲線的曲線,也可能是一個單調下降的上述曲線,還可以是一條S形曲線。它要求X值不能小于0(因為指數(shù)是實數(shù),故有此要求)。在很多情況下它都可以擬合ELISA的反應曲線,所以它也成了ELISA中應用最廣的模型之一。
曲線擬合方法雖多，要根據(jù)不同類型ELISA本身的特點，選擇最適合的曲線擬合模型，才能得到最合理的實驗結果。一般情況下，需要綜合考慮標準曲線的趨勢走向以及R值的大小以及樣本落值情況。
利用Excel四步輕松搞定 ELISA標準曲線的制作！
第一步：在Excel表格中輸入濃度和OD值
第 二 步：粘貼”數(shù)字部分貼入ELISA Calc
第 三 步：選擇回歸/擬合模型
第 四 步：由 Y 計算 Ｘ
上海恒遠生物科技有限公司擁有自己的實驗室，備有專業(yè)的技術研發(fā)團隊，長期致力于各種生物試劑，細胞，血清，ELISA試劑盒的研發(fā)與銷售，實驗提供免費代測服務，并提供精湛的技術服務，如果您有實驗上的問題歡迎前來咨詢，為您提供專業(yè)的一對一技術指導。
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