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恒遠生物|如何構建細胞系?

閱讀次數(shù):1039    發(fā)布時間:2022/5/30 16:58:59

各種已被命名和經(jīng)過細胞生物學鑒定的細胞系或細胞株 ,都是一些形態(tài)比較均一、生長增殖比較穩(wěn)定的和生物 性狀清楚的細胞群。因此凡符合上述情況的細胞群也可 給以相應的名稱,即文獻中常稱之為已鑒定的細胞(Certified Cells)。
 
已鑒定的細胞可用于各種實驗研究和生產(chǎn)生物制品。當前世界上已建的各種細胞系(株)已難勝數(shù),我國也建有百種以上,并在不斷增長中。
 
體外培養(yǎng)細胞的種類和命名
 
體外培養(yǎng)細胞的名稱,隨培養(yǎng)細胞技術的發(fā)展和細胞種類的增多而演變。最早采用的名稱為細胞株(Cell strain),以后又出現(xiàn)細胞系(Cell Line)一詞,兩者曾一度混用致概念不明確,導致文獻中也很混亂。我國也曾有類似情況,在我國尚未制定出統(tǒng)一名詞前,本書用的名詞基本參考 Schaeffer,W.I.(1979)和國內有關會議、以及國內外雜志常用名詞為準。
 
1、細胞系(Cell Line):原代培養(yǎng)舞經(jīng)首次傳代成功即成細胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系(Lineage of Cells)所組成。
 
2、細胞株(Cell Strain):通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物稱為細胞株。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。如果不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限,稱為有限細胞株(finitecell strain);如果可以連續(xù)傳代,稱為連續(xù)細胞株(continuous cell strain)。對于人類腫瘤細胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
 
(一)初代培養(yǎng)
 
初代培養(yǎng)又稱原代培養(yǎng),即直接從體內取出的細胞、組織和器官進行的第一次的培養(yǎng)物。一旦已進行傳代培養(yǎng)(Subculture)的細胞,便不再稱為初代培養(yǎng),而改稱為細胞系。
 
(二)細胞系
 
初代培養(yǎng)物開始第一次傳代培養(yǎng)后的細胞,即稱之為細胞系。如細胞系的生存期有限,則稱之為有限細胞系(Finite Cell Line);已獲無限繁殖能力能持續(xù)生存的細胞系,稱連續(xù)細胞系或無限細胞系(Infinite Cell Line)。無限細胞系大多已發(fā)生異倍化,具異倍體核型,有的可能已成為惡性細胞,因此本質上已是發(fā)生轉化的細胞系。無限細胞系有的只有永生性(或不死性),但仍保留接觸抑制和無異體接種致癌性;有的不僅有永生性,異體接種也有致瘤性,說明已惡性化。這兩種不同性質的無限細胞系,在國內外文獻中對這些名詞的應用上也常不十分嚴格。為概念上的明確,本書中對有惡性的無限細胞系采用!°惡性轉化細胞系!±一詞表示可能更妥。而對那些只具永生性而無惡性的細胞系,則用無限細胞系或轉化細胞系即可。當前流傳的 NIH3T3、Rat-1、10T1/2等均屬這類細胞系。
 
由某一細胞系分離出來的、在性狀上與原細胞系不同的細胞系,稱該細胞系的亞系(Subline)。
 
(三)克隆細胞株
 
從一個經(jīng)過生物學鑒定的細胞系用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群,稱細胞株。再由原細胞株進一步分離培養(yǎng)出與原株性狀不同的細胞群,亦可稱之為亞株(Substrain)
 
(四)二倍體細胞
 
細胞群染色體數(shù)目具有與原供體二倍細胞染色體數(shù)相同或基本相同(2n細胞占 75%或 80%以上)的細胞群,稱二倍體細胞培養(yǎng)。如僅數(shù)目相同,而核型不同的即染色體形態(tài)有改變者為假二倍體。二倍體細胞在正常情況下具有限生命期,故屬有限細胞系。但隨供體年齡和組織細胞的不同,二倍體細胞的壽命長短各異。人胚肺成纖維細胞可傳 50代土 10代,人胚腎只有 8~10代,人胚神經(jīng)膠質細胞 15~30代;如從老齡個體取可傳 50則細胞生存期更短。由不同年齡供體取材建立的二倍體細胞系可供研究衰老之用。為保持二倍體細胞能長期被利用,一般在初代或2~5代即大量凍存作為原種(Stook Cells),用時再進行繁殖,用后再繼續(xù)凍存,可供長期使用或延緩細胞的衰老。
 
(五)遺傳缺陷細胞
 
從有先天遺傳缺陷者取材(主要為成纖維細胞)培養(yǎng)的細胞,或用人工方法誘發(fā)突變的細胞,都屬遺傳缺欠細胞。這類細胞可能具有二倍體核型,也可呈異倍體。
 
(六)腫瘤細胞系或株
 
這是現(xiàn)有細胞系中最多的一類,我國已建細胞系主要為這類細胞。腫瘤細胞系多由癌瘤建成,多呈類上皮型細胞,常已傳幾十代或百代以上,并具有不死性和異體接種致瘤性。
 
對已建成的各種細胞系或細胞株習慣上都給以名稱;細胞的命名無嚴格統(tǒng)一規(guī)定,大多采用有一定意義縮寫字或代號表示。但不論什么形式,均不宜太長,以便記憶和了解。
 
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