ELISA試劑盒有許多實驗操作步驟,新手操作難免犯錯。其中許多過錯是由不充分的細節(jié)造成的。有很多方法可以減少這種過錯,比方在做實驗時少說話,以防止唾液掉進酶的標簽中。當然,我們也要學會探索自己的問題,找出原因。那么,我們怎么改善ELISA試劑盒實驗中的過錯呢?
一、點評試劑的實用性
試劑的穩(wěn)定性對準確度非常重要。在啟用ELISA試劑盒之前,應重復檢測陰性和陽性對照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能運用。
二、操作前仔細閱讀ELISA試劑盒說明書
嚴格依照說明書要求進行標準化操作。不同批號的試劑不混合。值得改善的是,只有經過重復的試驗,如洗盤的數量,才能加以改善。
三、加樣要準確、快速
樣品添加的不準確度和酶制劑用量的不確認度直接影響顯色效果。此外,顯色深度和A值的確認與顯色劑和終液體的參加量有關,因而樣品的裝載應謹慎。需要在一定時間內完成采樣的試驗,假如采樣速度慢,會呈現差錯,試劑會露出很長時間,特別是當室溫過高時,保質期會縮短乃至失效。
四、檢驗技術人員應具備試驗室操作的基本素質和實踐經驗
測技術人員可以熟練操作試驗儀器儀表,具有一定的總結和分析問題的才能,能及時、妥善地處理ELISA試劑盒試驗中呈現的意外狀況。
五、洗刷要完全
洗版不完全,酶偶聯(lián)物的布景顏色為假陽性。此外,清潔劑應該是新鮮的,可以隨時運用。舊的洗刷劑會添加布景,也可能呈現假陽性。
六、嚴控ELISA試劑盒試驗反應時間
ELISA試劑盒反應時間過長,酶被滅活,反應時間過短,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能完全結合,產物結構松懈不穩(wěn)定,易清洗,易產生假陰性。
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