在ELISA試劑盒發(fā)展的過程中，樣本前處理技術(shù)一直沒有受到重視，相對與現(xiàn)代分析技術(shù)的快速發(fā)展，樣本前處理技術(shù)以及儀器的發(fā)展滯后并制約了分析化學(xué)的發(fā)展，在過去的很多年中，分析化學(xué)的發(fā)展集中在研究分析方法的本身：如何提高ELISA靈敏度、選擇性以及分析速度；如何應(yīng)用物理、化學(xué)、生物學(xué)等方面的理論來發(fā)展新的分析方法與技術(shù)，以滿足新技術(shù)對分析化學(xué)提出的新目標(biāo)與高要求；如何采用新技術(shù)的成果改進(jìn)分析儀器的性能、速度、以及自動(dòng)化的程度。長期以來忽視對前處理方法與技術(shù)的研究，是樣本前處理技術(shù)成為制約分析化學(xué)發(fā)展的瓶頸。
一、勻漿介質(zhì)的制備
一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖，0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質(zhì)。
二、組織勻漿的制備
1.取組織塊（0.1g～0.2g）zui少可到2～5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，準(zhǔn)確稱重，放入5ml的勻漿管中。
2.按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)（pH7.4，0.01mol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖，0.8%的氯化鈉溶液）或者0.86%的生理鹽水于勻漿管中，冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。
3.勻漿的方式有多種：手工勻漿，機(jī)器勻漿，超聲粉碎。
① 手工勻漿：左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手將搗桿垂直插入套管中，上下轉(zhuǎn)動(dòng)研磨數(shù)十次（6～8分鐘），充分研碎，制成10%的勻漿液。
② 機(jī)器勻漿：用組織搗碎機(jī)10000～15000 轉(zhuǎn)/分 上下研磨制成10%組織勻漿，也可用內(nèi)切式組織勻漿機(jī)制備（勻漿時(shí)間10秒/次，間隙30秒，連續(xù)3～5次，在冰水中進(jìn)行），皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時(shí)間。
③ 超聲粉碎：用超聲粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細(xì)胞破碎，也可用國產(chǎn)超聲波發(fā)生儀，用400安培，5秒/次，間隙10秒反復(fù)3～5次。
鏡檢觀察：取少量組織勻漿作涂片（直接涂片、染色均可以），顯微鏡下觀察細(xì)胞是否破碎，若沒有則可延長勻漿時(shí)間。
4.將制備好的10%勻漿液用普通離心機(jī)或低溫低速離心機(jī)2500轉(zhuǎn)/分左右,離心10～15分鐘，取上清液進(jìn)行測定。
三、樣本保存
動(dòng)物組織樣本暫時(shí)不測定，可立即低溫凍存，溫度越低越好，中間如不反復(fù)凍融，-20℃以下可保存三個(gè)月，-70℃以下可保存六個(gè)月。
制備好的勻漿液建議不要凍存，zui好當(dāng)天進(jìn)行測定，如放置時(shí)間過長相關(guān)酶活會(huì)有所下降，部分指標(biāo)4℃可存放3～5天(如SOD要存放2～3天，MDA可存放3～5，總蛋白測定可存5～7天等)。
對臨床檢驗(yàn)ELISA測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果，要從多方面進(jìn)行分析除試劑因素和操作因素之外，更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析，并采取相應(yīng)措施排除干擾作用。
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