ELISA實(shí)驗(yàn)雖說簡(jiǎn)單操作,但是有些細(xì)節(jié)您還需要了解,了解這些,能讓您的ELISA實(shí)驗(yàn)零誤差哦,一起來看看吧!
ELISA試劑盒防止實(shí)驗(yàn)誤差辦法總結(jié):
1.做實(shí)驗(yàn)時(shí)少說話,防止唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。
2.加樣時(shí),由低濃度向高濃度加,這么削減跳孔的概率。
3.參與一抗二抗需求放入37°。
4.移液器的運(yùn)用,加樣(抗體)等需求準(zhǔn)確定量的試劑時(shí)不運(yùn)用排槍,履歷證實(shí)排槍很不準(zhǔn)確,很簡(jiǎn)單跳孔,不要圖便宜買等級(jí)低的tips,因?yàn)镋LISA不但會(huì)拓寬被查看的目的蛋白,也會(huì)拓寬非特異聯(lián)絡(luò)的雜質(zhì)蛋白。
5.勤換槍頭。
6.倍比稀釋樣品時(shí),稀釋倍數(shù)最好要小于10。
7.一切跟裝ELISA試劑盒有關(guān)試劑的容器,玻璃制品要干烤過或運(yùn)用一次性的樹脂容器。
標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:
1.耗材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備8個(gè)1.5Ml離心管,寫上S1-S7、空白。
2.標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的選擇:
①若細(xì)胞上清樣本,建議用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
②若血清、血漿、組織勻漿樣本,用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
3.梯度稀釋:根據(jù)說明書,每管加入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基),吸取同體積溶解好的標(biāo)準(zhǔn)品到S1管中,吹打10次混勻,渦旋5S,從S1管中吸取同體積溶液到 S2管,吹打10次混勻,渦旋5s,同法稀釋S3-S7濃度。
4.空白: 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度。
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