我公司成立至今八年之久,在前面的內容中我司為大家介紹了許多ELISA相關操作方法、操作技巧、經驗總結等,有愈多用戶反應從中學到了不少知識。在今天的內容中,今天為大家重點講講ELISA試劑盒溶解與稀釋規(guī)范品的正確操作!
一、ELISA試劑盒溶解
(1)粉末規(guī)范品時間短離心,讓因運送沾到管蓋、管壁的規(guī)范品沉到管底。
(2)依據瓶標簽參加必定體積的蒸餾水,加水后輕柔渦旋震動,室溫靜置溶解10-30分鐘,讓粉末徹底溶解。
留意:加水后暫不必移液槍吹吸,防止蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,待徹底溶解后可吹吸或渦旋振動混勻。
二、規(guī)范品梯度稀釋:
(1)耗材預備:預備8個1.5Ml離心管,寫上S1-S7、空白。
(2)規(guī)范品稀釋液的挑選:若血清、血漿、安排勻漿樣本,用試劑盒中的規(guī)范品稀釋液,梯度稀釋規(guī)范品。若細胞上清樣本,主張用細胞培養(yǎng)基梯度稀釋規(guī)范品。
(3)梯度稀釋:依據說明書,每管參加等體積的規(guī)范品稀釋液(培養(yǎng)基)。汲取同體積溶解好的規(guī)范品到S1管中,吹打10次混勻,渦旋5S。從S1管中汲取同體積溶液到S2管,吹打10次混勻,渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。
(4)空白: ELISA試劑盒規(guī)范品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度。
留意:梯度稀釋規(guī)范品時,渦旋震動混勻后可時間短離心,讓到蓋子、壁上的液體到管底,再開始稀釋下個濃度。規(guī)范品溶解、梯度稀釋是ELISA試驗要害點,按以上辦法梯度稀釋就可!
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