閱讀次數：1984 發(fā)布時間：2018/2/8 10:01:42
目前，針對分子生物學實驗有多種技術方法，那么我們該如何判斷選擇哪種方法適合呢？我們需要去了解實驗方法的特性。無非就是用某種特定的刺激物（如細胞活素）去刺激一些細胞或組織，讓它們high起來，然后分析細胞對這些外源刺激物的反應，檢測細胞內哪條信號通路被激活或失活，或者什么蛋白被分泌出來。每一種實驗方法都有它的特性，上海恒遠生物今天就以下幾種方法做介紹：
什么時候用免疫印跡實驗？
免疫印跡實驗（Western Blot，WB）可檢測信號通路中某種蛋白質的特性、表達和分布，分析容量大、敏感度高、特異性強。建立蛋白質的個人檔案
但至于蛋白-蛋白相互作用則要用另一種更復雜的方法，即免疫共沉淀法（Co-immunoprecipitation，Co-IP），它接近細胞內的生理情況，是以成為經典方法。
什么時候用表面等離子體共振？
表面等離子共振（Surface Plasmon Resonance，SPR）除了研究蛋白-蛋白相互作用（例如受體-配體相互作用），還有可研究小分子-蛋白或細胞-蛋白的相互作用。這種方法不需要標記蛋白（熒光標記或同位素標記），還可以實時定量分析這些相互作用的親和力、熱力學、動力學特性。SPR是分析動力學和親和力的金標準。
什么時候用電泳遷移率實驗？
電泳遷移率實驗（Electrophoretic Mobility Shift Assay，EMSA）最初用于檢測DNA結合蛋白與相應的DNA序列結合的情況，可做定性和定量分析，包括細胞核中的轉錄因子（如NF-kB ）的活性等等，現在也常用于研究RNA結合蛋白和相應的RNA序列相互作用。
這些分析用酶聯(lián)免疫吸附實驗（EenzymeLinked ImmunosorbentAssay，ELISA）也可以做，原理差不多。
什么時候用聚合酶鏈式反應？
PCR（Polymerase Chain Reaction）或Real Time PCR可以把特定的DNA序列大幅擴增，便于檢測活性基因的表達情況。而且PCR用途很廣。
什么時候用酶聯(lián)免疫吸附劑測定？
酶聯(lián)免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）如果要看看細胞外如何，比如細胞培養(yǎng)上清液或體液中的某種蛋白質分泌情況，則通常選用ELISA，從而獲知相應基因的活性。
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2.高特異性：進行了廣泛的非特異性排查，避免了由于交叉反應和干擾導致的錯誤實驗數據；
3.精確性高：通過回收率試驗和線性稀釋實驗，確保樣本值的準確性；
4.可重復性高：高于同類產品的精確度（較低的 CV%），保證了實驗的可重復性，避免因實驗數據檢測誤差導致研究結果的偏差。與前一批次的試劑盒測試比較，以確保最小批間差異；
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原創(chuàng)作者：上海恒遠生物科技有限公司
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