閱讀次數(shù)：5853 發(fā)布時(shí)間：2018/2/1 10:25:14
早春二月，背陰處的冰雪還未化盡，冬的寒意還未全消，柳樹卻早已抽出一條條翠綠的枝條，吐出一簇簇嫩綠的新芽，迎接著春姑娘的到來。瞧，它那長長、軟軟的枝條在那平靜的湖面上款款搖擺，動作是那樣輕快、那樣溫柔。今天是二月的首個(gè)工作日，上海恒遠(yuǎn)小編將為您帶來BSA簡介及在內(nèi)切酶的緩沖液的作用,希望您會喜歡！
首先帶大家了解下什么是BSA？
BSA(牛血清白蛋白)，又稱第五組分，是牛血清中的一種球蛋白，包含583個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.430 kDa，等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，例如在western blot中作為Blocking agent。
牛血清中的簡單蛋白，是血液的主要成分(38g/100ml)，分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成，其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。
BSA貯存方法：
每10克加100毫升水進(jìn)行溶解，或用PBS溶解也可，視用途而決定。然后分裝成小支。若不使用防腐劑可貯存在零下20或30攝氏度的恒溫柜中，若使用防腐劑(如0.1%疊氮化鈉)則可貯存在零上4攝氏度的環(huán)境下。一般可存放數(shù)月不變質(zhì)。防腐劑可能對牛血清白蛋白的效果造成影響，應(yīng)慎用。
BSA主要作用：
BSA一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中，因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环�(wěn)定或活性低。加入BSA后，它可能起到“保護(hù)”或“載體” 作用，不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什么影響。對多數(shù)底物DNA而言，BSA可以使酶切更完全，并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃，酶切反應(yīng)超過1h時(shí)，BSA可以使酶更加穩(wěn)定，因?yàn)樵诓缓珺SA的反應(yīng)緩沖液中，許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時(shí)間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。
BSA在內(nèi)切酶的緩沖液的作用：
1.BSA是酶的穩(wěn)定劑，防止酶的分解和非特異性吸附;
2.BSA能減輕有些酶的變性，能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱，表面張力及化學(xué)因素引起的變性的至于作用機(jī)理我不是很清楚，可能是因?yàn)樗Y(jié)構(gòu)中有17個(gè)二硫鍵，和一個(gè)巰基，巰基的化學(xué)反應(yīng)很活潑，二硫鍵有抗氧化還原的作用，因此可與多種陽離子，陰離子和小分子結(jié)合;
3.BSA能防止酶吸附到管壁而損失。
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