閱讀次數(shù)：1951 發(fā)布時間：2017/8/25 10:50:42
要保證ELISA實驗效果的必備要求有高品質(zhì)的試劑盒、良好的儀器、正確的操作，這三大點(diǎn)做好之后基本上就沒什么問題了。其中，還有一些注意事項和重點(diǎn)要求需要掌握。今天我們就來秋季暢談:ELISA步驟核心的那些事兒。就拿洗滌來說。這步驟有著決定性的作用，分有浸泡式、流水沖洗式兩種，ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的本公司要求使用的純化水電導(dǎo)率小于1.5μs/cm。
一、保溫：
在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時，產(chǎn)物的生成可達(dá)頂峰。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，反應(yīng)板不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。應(yīng)注意溫育的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。由于公司的試劑盒溫育是在空氣浴中完成，采用水浴會造成值偏高或花板。另外溫育中還有邊緣效應(yīng)，邊上的值會偏高，建議為了客觀的判斷結(jié)果，將質(zhì)控放在非邊緣位置。
二、基因工程抗原與合成肽抗原的區(qū)別：
基因工程抗原是抗原基因在質(zhì)粒載體中原核或真核表達(dá)的蛋白質(zhì)抗原，多以大腸桿菌或酵母菌為表達(dá)系統(tǒng)。該類抗原與合成肽相比，分子量大。合成肽采用化學(xué)方法制備，由于工藝的局限，合成數(shù)量有限，只能達(dá)到數(shù)百個氨基酸；而利用基因工程制備的抗原，分子量更大。
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