閱讀次數(shù)：847 發(fā)布時(shí)間：2017/5/4 9:47:21
那一天，Western Blot 沒有跑出帶，讓你驚慌失措！
那一月，Th細(xì)胞分不出，讓你的實(shí)驗(yàn)止步不前！
那一年，載體構(gòu)建蛋白表達(dá)極低，讓你錯(cuò)過了畢業(yè)期！
是不是有種科研之路，一入侯門深似海的感覺？
不用擔(dān)心，在今天——
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一、規(guī)范曲線：
1.定量辦法：規(guī)范曲線最少由5個(gè)濃度組成，測定次數(shù)不少于5次，以斷定作業(yè)濃度規(guī)模和IC50規(guī)模。
2.定性辦法：作業(yè)濃度規(guī)模經(jīng)過陰性、臨界值濃度和陽性的樣品測定來斷定，每個(gè)濃度重復(fù)不少于5次，濃度與響應(yīng)值之間應(yīng)有必定的聯(lián)系。
二、檢查限和定量限：
1.檢查限：20份空白樣品測定均值加3倍規(guī)范差。
2.定量限：應(yīng)大于規(guī)范曲線中最低濃度點(diǎn)。關(guān)于定量辦法，應(yīng)對該濃度樣品最少測定6次進(jìn)行驗(yàn)證，而不能經(jīng)過外延法揣度。
三、臨界值（cut-off值）的斷定：
關(guān)于有最高殘留定量的藥物，檢查辦法的臨界值為20份增加MRL濃度的樣品重復(fù)3次測定的均值減去1.64倍規(guī)范差，即95%置信限處。關(guān)于禁用藥物，檢查辦法的臨界值為定量限，該值應(yīng)達(dá)到公認(rèn)的目標(biāo)。
四、精密度和準(zhǔn)確度：
關(guān)于有最高殘留定量的藥物，增加濃度為MRL及MRL上下各一個(gè)濃度；關(guān)于禁用藥物，增加濃度為定量限和2倍定量限，每個(gè)增加濃度最少測定5個(gè)平行樣，并最少進(jìn)行3批實(shí)驗(yàn)（不一樣檢查日期，不一樣規(guī)范曲線，不一樣批次試劑盒）。
1.準(zhǔn)確度：回收率規(guī)模大于40%或契合相應(yīng)檢查規(guī)范的請求。
2.精密度：以變異系數(shù)表明。
批內(nèi)變異系數(shù)：每批平行樣之間的變異系數(shù)小于或等于25%，關(guān)于禁用藥物小于或等于30%.
批間變異系數(shù)：所有樣品之間的變異系數(shù)值小于或等于30%，關(guān)于禁用藥物小于或等于40%.
定性辦法：陰性和陽性樣品各測定不少于50份，斷定假陽性率和假陰性率。
五、穿插反響：
試劑盒與待檢藥物類似物、代謝物或一起存在的藥物測定穿插反響率。
六、保留期：
保留期經(jīng)過保留條件的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果斷定。
七、復(fù)核實(shí)驗(yàn)：
1.定量辦法：檢查限、IC50以及最少兩個(gè)增加濃度的準(zhǔn)確度和精密度，并與理化辦法（或與具代表性進(jìn)口試劑盒）對比。
2.定性辦法：檢查限、假陽性率和假陰性率。
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