閱讀次數(shù)：1014 發(fā)布時(shí)間：2017/4/26 9:15:51
昨天下午，來(lái)自華南師范大學(xué)的瞿老師致電我司吳經(jīng)理咨詢ELISA實(shí)驗(yàn)相關(guān)技術(shù)。還記得春節(jié)前，瞿老師在我公司購(gòu)買了大鼠白介素5試劑盒，售后反應(yīng)非常好，這次來(lái)電向我公司吳經(jīng)理主要咨詢的是ELISA檢測(cè)交叉反應(yīng)問(wèn)題。
如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的特異性，其中抗體來(lái)源所帶來(lái)的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個(gè)因素。在吳經(jīng)理與客戶交流ELISA交叉反應(yīng)的過(guò)程中，吳經(jīng)理說(shuō)道：“盡管現(xiàn)在購(gòu)買源自指定動(dòng)物的抗體越來(lái)越容易，我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會(huì)產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問(wèn)題。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)用的二抗必須特異性針對(duì)檢測(cè)一抗，而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。如果檢測(cè)用二抗與捕獲抗體結(jié)合，實(shí)驗(yàn)特異性就會(huì)大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測(cè)一抗，來(lái)避免上述問(wèn)題。”
如今檢測(cè)ELISA有許多途徑，我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇。一般ELISA檢測(cè)的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶，而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物。這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的顏色，可以通過(guò)分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)，堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結(jié)合在一抗上，也可以結(jié)合在二抗上，還可以使用鏈霉親和素標(biāo)記的酶與親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合。此外ELISA的結(jié)果檢測(cè)還包括放射性檢測(cè)、熒光檢測(cè)、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測(cè)等。
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