閱讀次數(shù):1600 發(fā)布時間:2017/4/7 9:47:28
切記:正確對待ELISA,不做危險實驗
ELISA檢測方法簡單,靈敏度超高,適合檢測血清或者培養(yǎng)上清的細胞因子、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測,病原體抗原的定性與定量。很多客戶有個誤區(qū),拿來一個指標就想當然地嘗試用ELISA去檢測。
正確對待ELISA,不做危險實驗!
·樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。
·批內與批見應分別小于9%和11%
ELISA試劑盒的制備程序:
1. 酸化尿液或組織勻漿增加200萬鹽酸PH值3.5。允許坐在4℃為15分鐘。離心機樣品中微量2分鐘去除沉淀。
2. 編寫的C18反相柱洗10毫升乙醇其次是10毫升去離子水。
3. 將樣品在一個輕微的正壓獲得流動率約0.5毫升/分鐘。ELISA試劑盒洗衣服柱用10毫升水,其次是10毫升的15%乙醇,最后10毫升已烷。洗脫樣本欄添加10毫升乙酸乙酯。
4. 如果分析是立即執(zhí)行,蒸發(fā)樣本下的氮流。至少添加250μ信用分析緩沖區(qū)的干燥樣品。渦然后允許坐5分鐘的房間溫度。重復兩次。如果ELISA試劑盒分析是被延遲,如乙酸乙酯洗脫樣品溶液在-80°直到免疫是運行。蒸發(fā)有機溶劑流下的氮在運行前試驗和重組如上。
ELISA試劑盒的操作技術有哪些影響?
1. 合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
2. 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
3. 嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
4. 加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。
5. 封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導致“花板”的出現(xiàn)。
上海恒遠生物是一家專門從事優(yōu)質ELISA試劑盒生產(chǎn)及銷售為一體的專業(yè)性機構,同時公司在標準品、抗體、培養(yǎng)基、血清、生化試劑等方面進行深入研發(fā)。我司還可提供免費技術指導服務,如果您在實驗中遇到任何不明白的,都可來電咨詢!
原創(chuàng)作者:上海恒遠生物科技有限公司
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