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酶聯(lián)免疫(ELISA)代測服務(wù)
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的..
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Western Blot實驗技術(shù)服務(wù)
Western Blot是利用抗原抗體的免疫反應(yīng),先將蛋白通過SDS-PAGE凝膠電泳分離開,再利用電場力的作..
解決方案

ELISA試劑盒靈敏度的高低判斷

閱讀次數(shù):1848    發(fā)布時間:2016/12/27 9:45:57

    根據(jù)經(jīng)理的統(tǒng)計與調(diào)查,ELISA試劑盒被廣泛應(yīng)用的原因主要有準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)的諸多因素。但這些優(yōu)點,并非全部的試劑盒都有具備,今天我們就一起來看看【ELISA試劑盒靈敏度】的高低判斷。
    其實,ELISA靈敏度和檢測樣本有些關(guān)聯(lián)的,如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,則對靈敏度要求相對小一些。如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問題。
    一般來說,試劑盒曲線上的最小濃度是比較準(zhǔn)確的,低于這個值因為與曲線是個“S"型結(jié)構(gòu)有關(guān),所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實驗誤差,所以達(dá)不到理想的效果。建議選擇試劑盒時,應(yīng)該看曲線上最小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。
    雖然酶活性調(diào)節(jié)ELISA方法的靈敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大ELISA中,檢測的靈敏度遠(yuǎn)比RIA高。根據(jù)質(zhì)量作用定律。即免疫反應(yīng)所形成的免疫復(fù)合物量與反應(yīng)物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數(shù)為1。已知1個摩爾濃度含6.02×1023個分子,那么理論推測酶活性放大ELISA方法的最低檢測限可達(dá)1.7×10-24mol/L。雖然在實際應(yīng)用中由于反應(yīng)條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響,往往達(dá)不到這個水平(大于104個分子),但表明ELISA在靈敏度方面的改進(jìn)潛力是很大的。
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