閱讀次數(shù)：1054 發(fā)布時(shí)間：2016/5/16 10:04:47
蛋白質(zhì)、糖蛋白、脂蛋白、酶類、補(bǔ)體、脂多糖、細(xì)菌外毒素和核酸等均為可溶性抗原，它們有相當(dāng)部分來源于組織和細(xì)胞，成分復(fù)雜。制備這類免疫原時(shí)，首先須將組織和細(xì)胞破碎，然后再?gòu)慕M織和細(xì)胞勻漿中提取目的蛋白或其他抗原，提純的抗原需鑒定后才能用做免疫原。
為獲得好的免疫效果，抗原純化后應(yīng)進(jìn)行鑒定才能用于動(dòng)物免疫，抗原的鑒定主要包括以下幾個(gè)方面：
1、含量檢測(cè)
蛋白含量的測(cè)定最準(zhǔn)確的方法是凱氏定氮法，但由于要求有精密設(shè)備，故不適合一般實(shí)驗(yàn)室。一般實(shí)驗(yàn)室均采用分光光度計(jì)測(cè)量法。該法首先測(cè)定280nm和260nm的吸光度（A），再用經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算蛋白含量。
蛋白含量（mg/ml）=A280×1.45-A260×0.74。
另外蛋白含量也可采用福林酚法，具體操作見臨床生化技術(shù)。
2、分子量的鑒定
測(cè)定分子量一般采用SDS-PAGE電泳法，詳見臨床生化技術(shù)。
3、純度鑒定
常采用區(qū)帶電泳法鑒定，詳見臨床生化技術(shù)。
4、免疫活性鑒定
常采用雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)。
原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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