閱讀次數(shù)：838 發(fā)布時間：2016/4/13 10:38:48
我司提供白細胞介素8(IL-8)ELISA檢測試劑盒周期長效價穩(wěn)定，采用純進口原裝抗體現(xiàn)包被生產(chǎn)，質(zhì)量有保證，白細胞介素8(IL-8)ELISA檢測試劑盒技術(shù)更全面。我司提供專業(yè)免費酶免代測服務(wù)，用于快速檢測測定血清、血漿及相關(guān)液體等樣本，一周內(nèi)可出結(jié)果，效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存，可提供全程技術(shù)指導(dǎo)。
白細胞介素8(IL-8)ELISA檢測試劑盒這些雷區(qū)請注意：
一、建議所有標(biāo)準品、樣本都做雙份檢測。
二、嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準.。
三、為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
四、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
五、底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。
本章小編為您解析關(guān)于使用夾心法測白介素的一些注意問題。
Il-8是一種分子量為8～10kD的多肽，對嗜中性粒細胞，T淋巴細胞、嗜鹼性粒細胞具有趨化作用，并可激活嗜中性粒細胞，是一種重要的炎癥介質(zhì)。在嚴重感染病人的血清中、炎癥局部滲出液中都可檢測到高水平的IL-8.此外，近年來的研究表明，IL-8可能與各種組織缺血后再灌注損傷的發(fā)生有關(guān)。我們采用兩株自制的單克隆抗體建立了夾心法ELISA用于檢測IL-8，敏感性可達156Pg/ml，操作簡單，重復(fù)性良好，可用于IL-8的基礎(chǔ)和臨床研究。
一、原理
采用兩株識別不同表位的抗IL-8單克隆抗體，其中一株(4D7)作為包被抗體，以識別和結(jié)合待檢標(biāo)本中的IL-8,另一株作為酶標(biāo)抗體，與結(jié)合于包被抗體的IL-8的另一個表位結(jié)合并催化底物顯色。
二、試劑器材
1. 試劑盒提供包被抗體、酶標(biāo)抗體、標(biāo)準品，底物(ABTS)、96孔ELISA板。
2. 包被緩沖液、PBS、底物緩沖液配制同常規(guī)ELISA法。
三、操作步驟
1. 包被：pH9.5 碳酸鹽緩液稀釋4D7單克隆抗體粗提γ球蛋白至1μg/ml,加入96孔板，100μl/孔，放4℃，36小時。
2. 封閉：0.1％吐溫PBS(Buffer A)沖洗96孔板三次，加3％BSA Buffer A(Buffer B)200μl/孔，放37℃，1小時。
3. 加待檢樣品：Buffer A 沖洗96孔板三次，加待檢樣品及Buffer B 稀釋的標(biāo)準品100μl/孔，放37℃，3小時。
4. 加酶標(biāo)抗體：Buffer A沖洗96孔板五次，3％PEG Buffer A稀釋酶標(biāo)抗體至1∶800，加入96孔板，100μl/孔，放37℃，1小時。
5. 顯色：Buffer A沖洗96孔板五次，pH5.4檸檬酸緩沖液溶解底物(ABTS)，0.2mg/ml,加3％H2O2,2μl/ml，加入96孔板，100μ/孔，室溫下或37℃顯色。
四、注意事項
1. 待檢標(biāo)本如為血清，應(yīng)采用一次性容器，血液采集后盡快(6小時以內(nèi))分離血清。
2. 封閉液或抗體稀釋液應(yīng)新鮮配制或凍存。
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原創(chuàng)作者：上海恒遠生物科技有限公司
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