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酶聯免疫(ELISA)代測服務
ELISA(酶聯接免疫吸附反應分析)是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的..
組織形態(tài)學實驗技術服務
組織包埋,切片,免疫組化,免疫熒光,偏振光,原位雜交,凋亡,常規(guī)染色,特殊染色,組織形態(tài)圖..
Western Blot實驗技術服務
Western Blot是利用抗原抗體的免疫反應,先將蛋白通過SDS-PAGE凝膠電泳分離開,再利用電場力的作..
解決方案

上海恒遠講解酶聯免疫吸附實驗

閱讀次數:904    發(fā)布時間:2016/1/22 8:53:44

如今ELISA方法已被廣泛應用于多種細菌和病毒等疾病的診斷。在動物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽狂犬病、藍舌病等的診斷中已為廣泛采用的標準方法。
   1定義:用酶標記抗原或抗體檢測液體(血液、細胞液)中未知抗體或抗原的方法。
原理:
1、利用抗原與抗體的特異性反應將待測物與酶鏈接
2、通過酶與底物產生顏色反應,用于定量測定
測定的對象可以是抗體也可以是抗原。
常用種類:
直接法(direct ELISA):將已知抗原直接吸附于載體,加酶標抗體。檢測抗體
間接法(indirect ELISA):將已知抗原吸附于固相載體,加酶標記二抗。檢測液相中未知抗體
雙抗體夾心法(Sandwich ELISA):將已知抗體吸附于固相載體,酶標記一抗。檢測液相的可溶性抗原
競爭法(Competitive ELISA):將已知抗體或抗原吸附于固體相載體,酶標記抗原或抗體。檢測液相中的可溶性抗原或抗體
阻斷法(Block ELISA)
將已知抗原吸附于固相載體,酶標記單克隆抗體。檢測液相中的可溶性抗體,
1、直接法測定抗原
A:將抗原吸附在載體表面
B:加酶標抗體,形成抗原—抗體復合物
C:加底物。底物的降解量=抗原量。
2、間接法測定抗體
A:將抗原吸附于固相載體表面
B:加抗體,形成抗原-抗體復合物
C:加酶標抗體
D:加底物。測定底物的降解量=抗體量
3、雙抗體夾心法測定抗原
A:將抗體吸附于固相表面
B:加待檢抗原,形成抗原—抗體復合物
C:加酶標抗體
D:加底物。底物的降解量=抗原量
4、競爭法測定抗原
A:將抗體吸附在固相載體表面
B:同時加入酶標抗原待測抗原,競爭結合抗體;對照只加入酶標抗原
C:加底物。對照品與樣品孔底物降解量的差=未知抗原量
5、阻斷法測定抗體
本法主要用于檢測型特異性抗體。該方法現已成為豬傳染性胃腸炎(TGE)、豬偽狂犬病(PR)及豬胸膜肺炎(AP)的主要檢測法。
A:將抗原吸附于在固相載體表面;
B:先加待檢血清(抗體),形成抗原-抗體復合物;
C:再加酶標單抗
D:加底物

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