細(xì)胞培養(yǎng)方法
1、收到細(xì)胞，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。
2、收到細(xì)胞，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。因路途耽擱等因素，細(xì)胞會(huì)有部分脫落。請(qǐng)?jiān)诔瑑襞_(tái)中將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基吸出一部分，保留大約5-6ml左右在培養(yǎng)瓶里。將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時(shí)之需。
3、24小時(shí)后，細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，就可以傳代了。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn)）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml胰酶消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般1-3分鐘，不超過5分鐘�？梢苑湃�37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見細(xì)胞脫落下來，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之完全脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過稀，有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
細(xì)胞培養(yǎng)條件
5,DMEM高糖+10%FBS+4mM L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸鈉）
2, L-G(L-谷氨酰胺)。L-Glutamine 200mM (GIBCO。貨號(hào)25030-081)
3,NEAA(非必需氨基酸).(GIBCO。貨號(hào)11140-050)
4..sodium.pyruvate (GIBCO。貨號(hào)11360-070)
5.丙酮酸鈉.貨號(hào) 11360-070
今天對(duì)于細(xì)胞方面的解說就到這里了。有任何問題可以來電咨詢，我司有專業(yè)的技術(shù)人員為您服務(wù)哦！
原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
