閱讀次數(shù):1090 發(fā)布時(shí)間:2016/1/7 9:42:38
ELISA
操作常見問題解決辦法
ELISA
方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但
ELISA
測(cè)定中影響因素較多,而且
其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。引
起
ELISA
測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①
標(biāo)本因素;
②
試劑因素;
③
操作因素。下面就一些
常見
ELISA
操作過程中的問題一一分析。
步驟 | 可能原因 | 解決辦法 |
選 材 | 選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑(可以看下ELISA試劑盒選購經(jīng)驗(yàn)總結(jié)篇),操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。 | |
加 樣
| 1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣; 2.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3.加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
| 1.標(biāo)本為血清:最好將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2.加樣后及時(shí)放入孵箱。 3.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 4.如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,最好選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
|
5.標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。 |
原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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