閱讀次數(shù)：1174 發(fā)布時(shí)間：2015/8/3 11:27:07
對(duì)酶聯(lián)免疫試劑盒的見(jiàn)解有不對(duì)的地方，希望指正或者直接拍磚。如何靈活應(yīng)用酶聯(lián)免疫試劑盒這個(gè)檢測(cè)方法以及如何去挑選ELISA試劑盒。酶聯(lián)免疫試劑盒這個(gè)方法的原理，大家都很清楚，網(wǎng)上的資料一大堆�？烧嬲闷饋�(lái)的時(shí)候，有時(shí)候就有點(diǎn)犯糊涂，我談一下自己的理解。
酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或者標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后用底物顯色。底物在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值，計(jì)算樣品濃度。我們?cè)诓僮髦袘?yīng)該注意以下幾點(diǎn)：
1． 酶聯(lián)免疫試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，酶聯(lián)免疫試劑盒并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請(qǐng)避光保存。
7． 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8． 所有樣品，酶聯(lián)免疫試劑盒洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9． 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
做到以上幾點(diǎn)，就不在為酶聯(lián)免疫試劑盒的實(shí)驗(yàn)而擔(dān)心了，酶聯(lián)免疫第三方檢測(cè)中心提供完善的技術(shù)指導(dǎo)，如有任何Elisa技術(shù)問(wèn)題均可來(lái)電咨詢。我們承諾為您提供全方位的服務(wù)。
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