閱讀次數(shù)：1172 發(fā)布時間：2015/7/29 9:35:32
酶聯(lián)免疫學(xué)第三方檢測中心是中國權(quán)威的科研實(shí)驗(yàn)生物試劑銷售服務(wù)商。產(chǎn)品貨期快、質(zhì)量品牌保障！ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。
以已知抗體(抗HBs)包被載體，然后將含有抗原的待檢標(biāo)本加入，共同孵育后，抗原結(jié)合于包被抗體上，再加入酶標(biāo)記特異抗體(酶標(biāo)抗HBs)，酶標(biāo)抗體連接到抗原上，最后加入底物溶液，根據(jù)顏色反應(yīng)來判定抗原含量。
【材料】HBsAg試劑盒，本試劑盒含:
1、包被抗-HBs反應(yīng)條 1瓶
2、酶結(jié)合物 1瓶
3、HBsAg陽性對照 1瓶
4、HBsAg陰性對照 1瓶
5、洗滌液:用前每瓶作1：20稀釋 1瓶
6、顯色劑（TMB）A 1瓶
7、顯色劑（TMB）B 1瓶
8、終止液 1瓶
【方法】
1、加入待測標(biāo)本每孔0.05ml，并設(shè)HBsAg陽性對照2孔，HBsAg陰性對照2孔，空白對照1孔，然后加入酶結(jié)合物每孔1滴(0.05ml、空白對照孔不加)，充分混勻后置37℃孵育30分鐘。
2、洗板:棄去反應(yīng)條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿每孔，棄去拍干，反復(fù)五次后拍干。
3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml)，然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml)，混勻，37℃孵育10分鐘。
4、每孔加終止液1滴(0.05ml)，混勻。
【結(jié)果】
比色法:波長450nm，先用空白孔校零點(diǎn)，然后讀取各孔光密度值。
樣品OD值/陰性對照平均OD值≥ 2.1判斷為陽性，否則為陰性。
備注：陰性對照平均OD值低于0.05作0.05計算，高于0.05按實(shí)際OD值計算。陽性對照OD值≥0.8，實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效。
【注意事項(xiàng)】
1、試劑盒置2℃～8℃保存。
2、使用前試劑應(yīng)搖勻，并棄去1～2滴后垂直滴加。
3、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及待測標(biāo)本所需微孔條，置室溫平衡30分鐘后再行測試，余者應(yīng)及時封存于冰箱中以備后用。
4、待測標(biāo)本不可用NaN3防腐。
5、不同批號試劑請勿通用。
6、結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。
7、若濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶時，請置37℃至溶解。
原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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