購(gòu)買ELISA試劑盒時(shí)，很多客戶們會(huì)比較關(guān)心“質(zhì)量過關(guān)嗎”“壽命長(zhǎng)久嗎”“精密度夠要求嗎”等相關(guān)問題。ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定最佳信號(hào)和最低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定，包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋，按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。這些都是一些基礎(chǔ)知識(shí)，今天酶聯(lián)免疫學(xué)第三方檢測(cè)中心帶您一起來看最新ELISA試劑盒操作技術(shù)常識(shí)分享：
試劑盒的配制：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書，注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml�？衫脴�(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度，建議孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
注意事項(xiàng)
1.濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
2.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
3.保存于2-8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。
什么是ELISA試劑盒的回收率？是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說你的回收率是99%，這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系，說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機(jī)氯含量測(cè)定，樣品水中含有無機(jī)氯20 mg/L，取100mL被測(cè)水樣品，加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品，測(cè)定時(shí)忽略體積變化，如果測(cè)定出樣品中無機(jī)氯為2.98mg/L，則認(rèn)為回收率為98%。
對(duì)于定量檢測(cè)來說，主要還是一個(gè)準(zhǔn)確度的驗(yàn)證。不過我看到別人寫的內(nèi)容比我自己想說的要好，所以就貼上去了。相對(duì)回收率可能會(huì)高于100%的，如果只是說“損失程度”，其實(shí)是不準(zhǔn)確的。應(yīng)該說，回收率越接近100%，說明這個(gè)試劑盒的準(zhǔn)確度越高。
原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
