在使用血清做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí),血清的質(zhì)量是極為重要的,關(guān)乎整個(gè)實(shí)驗(yàn)。今天上午,酶聯(lián)免疫學(xué)第三方檢測中心技術(shù)員為大家?guī)碜砹俗钚碌慕?jīng)驗(yàn)分享,用目測科研血清外觀來辨別質(zhì)量的方法。
一、顏色
根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,實(shí)際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。國產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,當(dāng)然,國產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。
進(jìn)口的或多或少總有點(diǎn)溶血,因?yàn)檎嬲难迥δ懿睿t細(xì)胞容易破裂。總的來說,國產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清,質(zhì)量最好的呈現(xiàn)出談黃、微紅色。當(dāng)然,熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)难,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。
二、沉淀
很多血清客戶,會發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題,這是沒有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國產(chǎn)的血清,大多來自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)境都不好,從采血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會經(jīng)過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。進(jìn)口的胎牛血清,過濾分裝前很少會反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,但隨著時(shí)間的推移,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀。當(dāng)然,進(jìn)口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀。當(dāng)然,購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時(shí)需要融化,融化過程最好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙。
三、澄清度
進(jìn)口血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。
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